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一、填空题
1、 根据产生抑制的机理的不同，酶催化反应的可逆抑制可以分为竞争性抑制、
抑制、 抑制和混合型抑制。

2、某酶催化反应的Km为4.7×10－5mol/L，最大反应速率为22µmol/(L•min)，底物浓度为2×10－4mol/L，抑制剂浓度为5×10－4mol/L，KI＝3×10－4mol/L，那么当抑制剂为非竞争性抑制时反应速率为 。
二、简答题
列表说明BSTR、CSTR和CPFR的不同之处。
三、计算题
一存在竞争性抑制的酶催化反应，已知Km=2.8×10-4mol/L KI=2×10-5mol/L，当底物浓度为1.5×10-3mol/L时，若抑制百分率为75％，求此时竞争性抑制剂的浓度。

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一、    请设计一个实验区分E. coli 和Staphylococcus aureus, 简述实验过程和实验原理。（15分）   
二、    从细胞结构、形态、菌落、繁殖等方面比较Saccharomyces cerevisiae和Bacillus subtilis。（15分）   
三、    试述淀粉在有氧及无氧条件下被微生物分解的代谢过程，写出主要代谢过程及涉及到的主要微生物，并说明有氧和无氧分解过程有何不同。（20分）   
四、    根据所需碳源、能源及呼吸所用电子供体，举出代表菌说明微生物四种不同的营养类型。（15分）   
五、    微生物基因重组形式有哪几种，试述其定义，并对这些重组形式进行比较。（20分）   
六、    试举出三种在菌种分类与鉴定中常用到的分子生物学方法，并简述其应用原理和意义。（15分）

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简答题：  
1、 理论分析重力沉降和离心沉降的异同点，在生物样品制备中常用的离心机（至少三个）  
2、 图解什么是液膜控制与气膜控制，各自的强化途径？  
3、 精馏过程相对挥发度的意义  
计算题  
1、在一塔径为1m的常压逆流填料塔中用清水吸收含溶质5%（体积%）混合气中的溶质，已知混合气的处理量为125kmol/h，操作条件下的平衡关系为y*=1.2x，气相体积传质总系数为180kmol/m3.h，吸收剂用量为最小用量的1.5倍，要求回收率达到95%。试求：（按低浓气体吸收）  
（1）吸收剂出塔浓度；  
（2）完成上述任务所需的填料层的高度；  
（3）若在以上填料层基础上加高2m，其它条件不变，问回收率可达到多少？  
2、实验室用一片A= 0.05m2的滤叶进行恒压过滤实验。过滤压差为66K pa，当过滤时间为300s时，获得滤液400ml，过滤时间为900s时，共获得滤液800ml。  
（1）写出此条件下的过滤方程。  
（2）在过滤900s后，用300ml水洗涤。洗涤压差与过滤压差相同，洗涤液粘度与滤液粘度相同，计算所需的洗涤时间。

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一、名词解释(6分×15, 共90分)  
等电聚焦电泳  
P/O比  
NADPH  
核酶  
酶的活性中心  
酶活力单位  
酮体  
乙醛酸循环  
糖异生作用  
RNA剪接  
多顺反子  
分子伴侣  
反馈抑制  
联合脱氨基作用  
第二信使  
二、是非判断题(2分×15, 共30分；正确的标 √，错误的标×)  
1.    淀粉、糖原和纤维素都属于均一多糖。（  ）  
2.    肽平面是指肽键的所有4个原子和与之相连的两个α碳原子，形成的具有一定刚性的平面，以便使肽链保持结构上的相对稳定性。（  ）  
3.    聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于分离蛋白质，但不能分离核酸。（  ）  
4.    在竞争性抑制中，底物、抑制剂争相与酶结合，但这种结合是不可逆的。（  ）  
5.    同工酶是指能催化同一种化学反应，但其分子结构却有所不同的一组酶。（  ）  
6.    Southern印迹用于分析RNA, 而Northern印迹用于分析DNA。（  ）  
7.    种子发芽时可将脂肪转化为糖，有可能是通过乙醛酸循环来实现的。（  ）  
8.    非糖物质合成葡萄糖的过程称为糖异生，是糖酵解途径的简单逆转。（  ）  
9.    四氢叶酸是一碳单位的载体，它在嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成中发挥重要作用。（  ）  
10.    已从大肠杆菌中分离到DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ和DNA聚合酶Ⅲ。其中DNA聚合酶Ⅰ是一个多亚基酶，是主要负责DNA复制的酶。（  ）  
11.    启动子是指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。（  ）  
12.    密码子专一性主要由前两位碱基决定，第3位碱基的重要性不大，此称为密码子的兼并性。（  ）  
13.    在原核生物mRNA前体的加工中，其5’端形成帽子结构，3’端加上多聚腺苷酸（poly A）尾巴。（  ）  
14.    代谢途径阻断可通过加入酶抑制剂或采用基因敲除的手段来实现。（  ）  
15.    根据当前认识，限制性核酸内切酶识别DNA的序列多属回文结构。（  ）  
三、简答题(15分×8, 共120分)  
1.    列举3种生物化学领域的英文刊物，以及您如何利用网络资源获取生化方面的研究信息。  
2.    简述蛋白质的二级结构和超二级结构。  
3.    简述磷酸戊糖途径及其生物学意义。  
4.    简述中心法则的基本内容，哪些方面是目前的研究热点？  
5.    简述聚合酶链反应（PCR）的原理和应用。  
6.    凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)与亲和层析的原理有何不同？  
7.    琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯凝胶电泳的原理有何不同？  
8.    糖酵解的主要步骤及关键酶？  
四、分析论述题(20分×8, 共60分)  
1.    蛋白质分离和提纯的常用方法及原理。  
2.    正常菌株中某酶由3亚基组成，具有催化活性，其突变株中该酶丧失了催化活性，试从基因序列、代谢和酶的结构等方面分析酶失活的原因。  
3.    下面英文摘自2005年3月的Proc Natl Acad Sci USA，谈谈其中所蕴含的生化知识、原理和技术手段, 以及您对此项研究的概括评价。  
Title: Biosynthesis of a D-amino acid in peptide linkage by an enzyme from frog skin secretions.  
Abstract  
D-amino acids are present in some peptides from amphibian skin. These residues are derived from the corresponding L-amino acids present in the respective precursors. From skin secretions of Bombinae, we have isolated an enzyme that catalyzes the isomerization of an L-Ile in position 2 of a model peptide to D-allo-Ile. In the course of this reaction, which proceeds without the addition of a cofactor, radioactivity from tritiated（含氚的）water is incorporated into the second position of the product. The amino acid sequence of this isomerase（异构酶）could be deduced from cloned cDNA and genomic DNA. After expression of this cDNA in oocytes（卵母细胞）of Xenopus laevis, isomerase activity could be detected. Polypeptides related to the frog skin enzyme are present in several vertebrate species, including humans.